Les différents types des microscopes - Optique , Photonique ,Electronique - FSSM

Les différents types des microscopes - Optique , Photonique ,Electronique
C’est quoi un microscope?
Le microscope est un instrument qui:
- Donne une image grossie d’un petit objet (grossissement).
- Sépare les détails de celui-ci sur l’image (résolution).
- Rend les détails visibles à l’œil ou avec une caméra.

Microscope optique :

Objectif :
- C ’est une lentille de courte focale (quelques mm)
- Un objet placé à proximité de son foyer donne une image intermédiaire agrandie et renversée
- Le grandissement de l ’objectif est noté g1
- Un dispositif de rotation permet de changer l ’objectif

Oculaire :

- C ’est une lentille de plus grande focale (quelques cm)

- Il sert de loupe en grossissant l’image intermédiaire donnée par l ’objectif

- Le grossissement de l ’objectif est noté G2

Caractéristiques d ’un microscope :

- L ’intervalle optique

- La latitude de mise au point

- Le cercle oculaire

- Le grossissement standard G

L ’intervalle optique :

C ’est la distance qui sépare le foyer image de l ’objectif du foyer objet de l ’oculaire

Cette distance est fixe : D ~220 cm

La latitude de mise au point :

Le cercle oculaire

- C ’est l ’image de l ’objectif à travers l ’oculaire

- L ’œil doit être placé au cercle oculaire pour recevoir toute la lumière émergente de l ’objet

Le grossissement standard G

C ’est un nombre qui dépend :

- Du grandissement g1 de l ’objectif

- Du grossissement G2 de l ’oculaire

Il se calcule par la relation : G = g1 * G2

On note par exemple: G=10x40 ou (x400) - L’image est 400 fois plus grande que l’objet actuel

Un grossissement de 40X à 1000X

Caractéristique de microscope optique :

- Très commun

- Comprend plusieurs lentilles

- Nécessite une source de lumière

- La lumière passe à travers du spécimen et puis à travers les lentilles.

Les lentilles plient la lumière pour que l’image soit agrandi

-Résolution: objets qui sont si petit que 200nm (la taille d’une

bactérie)

- Un grossissement de 40X à 1000X

- Peut être utilisé pour voir des spécimens vivants

Les différents types du microscope optique :

- Le microscope à fond clair

- Le microscope à fond noir

- Le microscope à contraste de phase

- Le Microscope à fluorescence

Le microscope à fond clair :

Caractéristiques :

- Utilise des rayons lumineux
- Permet le grossissement de 1500-2000 fois - Épaisseur de coupe ( 1-5 µm)

- Observation vitale et colorée

- C’est le plus courant et le plus ancien

- Il permet de recueillir la lumière de la source directement dans les objectifs, après avoir été transmise par l’échantillon

- L’ échantillon est éclairé par-dessous et observé par-dessus.

- peut améliorer l’observation en colorant les échantillons

- Visualiser des objets vivants variés (bactéries, unicellulaires…) ou fixés (coupes histologiques…)

Le microscope à fond noir :

- Utilise les rayons lumineux dans un fond noir.

- Utilisé pour les éléments trop transparents

- Les éléments observés apparaissent très brillants (les flagelles, les fibres )

- N'est pas utilisé pour l'observation d'objets colorés

Le microscope à contraste de phase :

- Cette technique permet d'observer les cellules sans préparation ni coloration dans leur milieu d'origine.

- Le principe est basé sur le fait que les structures biologiques sont transparentes (n’absorbe pas la lumière transmise).

- Nécessite un éclairage très précis dite éclairage de Koehler.

- A l’observation, on voit une image en noir et blanc où les différentes structures apparaissent bordées de blanc d’un

côté et de noir de l’autre.

Le microscope à fluorescence :

- Cette technique est utilisée pour certaines molécules qui émettent de la lumière quand on les éclaire avec une lumière de longueur d'onde supérieure.

- On éclaire l'échantillon avec une lumière ultraviolette, violette ou bleue.

- Consiste à utiliser une coloration fluorescente. Deux colorants très utilisés sont : la rhodamine (émet une lumière rouge) et la fluorescéine (lumière verte).

Structures intracellulaires (noyau en bleu et filaments d'actine en rouge) et suivi de l'internalisation d'une protéine (la transferrine en vert)